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多聚HRP,低丰度蛋白信号放大器

发布者:真人斗牛app    发布时间:2022-05-27     
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曾经有小伙伴反应(ying),我(wo)的(de)目(mu)的(de)蛋白做(zuo)WB没有条带或(huo)者条带特别淡(dan),做(zuo)IHC也(ye)没有阳性结(jie)(jie)(jie)果(guo),尝试了不(bu)同(tong)稀释比的(de)抗(kang)(kang)(kang)原(yuan),一抗(kang)(kang)(kang),二抗(kang)(kang)(kang),更换了不(bu)同(tong)厂家生产(chan)的(de)抗(kang)(kang)(kang)体,结(jie)(jie)(jie)果(guo)还是(shi)不(bu)好(hao),内参和其(qi)他蛋白都有正常(chang)的(de)结(jie)(jie)(jie)果(guo),到底是(shi)什么原(yuan)因了?最后(hou)(hou)我(wo)们提醒客(ke)户(hu)(hu),是(shi)不(bu)是(shi)目(mu)的(de)蛋白本身的(de)表达量(liang)就非(fei)常(chang)低,增(zeng)加抗(kang)(kang)(kang)体浓度的(de)作用(yong)也(ye)是(shi)非(fei)常(chang)有限的(de),最后(hou)(hou)客(ke)户(hu)(hu)又看到相关文献,报道该(gai)目(mu)的(de)蛋白在正常(chang)样本种表达量(liang)确实特别低,都到皮克级别了,难(nan)怪常(chang)规(gui)的(de)WB和IHC检测(ce)结(jie)(jie)(jie)果(guo)不(bu)好(hao),于是(shi)我(wo)们给客(ke)户(hu)(hu)推(tui)荐了多聚HRP标记的(de)二抗(kang)(kang)(kang),成(cheng)功检测(ce)到了阳性结(jie)(jie)(jie)果(guo)。

 

Poly HRP是一种增(zeng)强信(xin)(xin)(xin)(xin)号的(de)酶(mei)标(biao)记物(wu),由(you)共(gong)价(jia)辣(la)根过(guo)氧(yang)化(hua)物(wu)酶(mei)(HRP)聚(ju)合(he)物(wu)组成。目(mu)的(de)蛋白的(de)信(xin)(xin)(xin)(xin)号通过(guo)抗(kang)体传递给Poly HRP上携带的(de)大量HRP分(fen)子,然后HRP分(fen)子作(zuo)用(yong)于底物(wu)释放信(xin)(xin)(xin)(xin)号,使得(de)目(mu)的(de)蛋白检(jian)测信(xin)(xin)(xin)(xin)号得(de)到放大,这(zhei)些信(xin)(xin)(xin)(xin)号放大程度与HRP聚(ju)合(he)范(fan)围成正比,从而可(ke)以利用(yong)多聚(ju)HRP在免(mian)疫(yi)分(fen)析中检(jian)测到低丰度蛋白(pg级别范(fan)围)。

 

HRP聚合体.jpg

 

SA-PolyHRP40.jpg

HRP聚合体以及SA-PolyHRP40示意图

 

注:

灰(hui)色的是SA(链霉亲(qin)和(he)素)

褐色(se)的(de)是HRP

 

链霉亲和素-poly HRP缀合物(SA-PolyHRP)由五个相同的HRP同聚物组成,同时与多个链霉亲和素分子共价偶联。目前生产过程中使用了三种不同的同聚物,它们分别是PolyHRP20、PolyHRP40和PolyHRP80。链霉亲和素-PolyHRP80比链霉亲和素-PolyHRP40灵敏度更高,链霉亲和素-PolyHRP40比链霉亲和素-PolyHRP20灵敏度更高。

 

不同尺寸HRP多聚体.png

不同尺寸HRP多聚体示意图

 

用链霉亲和素-PolyHRP技术检测(ce)技术标记非常(chang)简(jian)单,可(ke)以将它们结合到现(xian)有(you)(you)的测(ce)定系(xi)统中(zhong),现(xian)有(you)(you)的步骤,孵育间隔等几乎(hu)不(bu)需要改变。所需试(shi)剂基本(ben)上与(yu)使用标准链霉亲和素-HRP进(jin)行的常(chang)规ELISA相同(tong)。类似地,PolyHRP几乎(hu)可(ke)用于(yu)任何以HRP底物开发(fa)的检测(ce)系(xi)统(比色法、荧光(guang)法、包括化学发(fa)光(guang)),这也(ye)意(yi)味(wei)着与(yu)现(xian)有(you)(you)的ELISA和IHC仪(yi)器(qi)完全兼容。PolyHRP检测(ce)可(ke)能有(you)(you)利的其他(ta)分析(xi)方法包括高(gao)灵敏度DNA/RNA杂交分析(xi)和配体受(shou)体分析(xi)。

 

PolyHRP的优势:

灵敏度高(gao):polyHRP可以检测极低的目标(皮克-飞克范围),信噪比高;

灵活(huo):兼容的显色,荧光和化学发光底物

高(gao)效(xiao):试剂纯度高,不含未结合的分子,具有高比活度和低背景

稳定:即用型液体试剂可保存在4℃,

性(xing)价(jia)比高(gao):每次测定所需的偶联物远远少于常规测定

用途(tu)多样:兼容ELISA, Western blotting,免疫组化等

易(yi)于使用:可直接替代免疫分析和其他检测方法

 

在这里小艾给大家推荐真人斗(dou)牛app代理品牌Fitzgerald生产的多聚HRP相关产品,包括链霉亲和素-polyHRP(Streptavidin Poly-HRP),polyHRP标记的各类二抗:

 

相(xiang)关(guan)产品推荐:

货(huo)号产品名称规格
30R-AA034Aminoethyl Poly-HRP405 mg
65R-P102Protein A/G-Poly-HRP401 mg
65R-P100Protein A-Poly-HRP201 mg
65R-P103Protein A-Poly-HRP2050 ug
65R-P101Protein A-Poly-HRP401 mg
65R-P104Protein A-Poly-HRP4050 ug
55R-APBLOTProtein A-Poly-HRP Blotting Developer Kit1 kit
85R-115Stabilizing Buffer (BSA based)100 ml
85R-116Stabilizing Buffer (Casein based)100 ml
85R-121TMB Substrate30 ml
43R-IG101PHGoat anti Mouse IgG (H + L) (Poly-HRP40)1 mg
43R-IG163PHGoat anti Mouse IgG (H + L) (Poly-HRP40)50 ug
55R-GAMPBLOTMouse IgG (H + L) Poly-HRP Blotting Develope1 kit
43R-IG096PHRPGoat anti Rabbit IgG (H + L) (Poly-HRP40)1 mg
43R-IG164PHGoat anti Rabbit IgG (H + L) (Poly-HRP40)50 ug
55R-GARPBLOTRabbit IgG (H + L) Poly-HRP Blotting Developer1 kit
30R-AH071Mouse IgG Blocking Reagent10 ml
61R-I169Mouse anti Human IgG (biotin)1 mg
61R-I167Mouse anti Human IgG (DY549)1 mg
61R-I165AHRP40Human IgG (Poly-HRP)1 mg
61R-I164AHRP40Human IgG (Poly-HRP) Fab'2500 ug
61R-I166AHRP40Human IgG (Poly-HRP)50 ug
61R-I163AHRP40Human IgM antibody (Poly-HRP)1 ml
85R-125PBS (10X Concentrate)100 ml
85R-120TMB Substrate30 ml
85R-112Streptavidin Poly-HRP Conjugate Stabilizer100 ml
85R-104Streptavidin Poly-HRP Conjugate Stabilizer1 liter
65R-S129Streptavidin protein (DY549)1 mg
85R-127Substrate Buffer (10X Concentrate)100 ml
85R-123Stop/Elution Solution100 ml
65R-S124Streptavidin-Glucose Oxidase1 mg
65R-S126Streptavidin-Glucose Oxidase (Polymeric 20X)1 mg
65R-S125Streptavidin-Glucose Oxidase (Oligomeric 5X)1 mg
65R-S103PHRPStreptavidin Poly-HRP20 Conjugate1 mg
65R-S103PHRPStreptavidin Poly-HRP20 Conjugate200 ug
65R-S108Streptavidin Poly-HRP20 Conjugate50 ug
65R-S104PHRPStreptavidin Poly-HRP40 Conjugate1 mg
65R-S104PHRPStreptavidin Poly-HRP40 Conjugate100 ug
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65R-S105PHRPStreptavidin Poly-HRP80 Conjugate1 mg
65R-S105PHRPStreptavidin Poly-HRP80 Conjugate100 ug
55R-SPBLOTStreptavidin Poly-HRP Blotting Starter Kit1 kit
55R-START01Streptavidin Poly-HRP ELISA Starter Kit1 kit
55R-START1Streptavidin Poly-HRP ELISA Starter Kit1 kit
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85R-126Wash Buffer (10X Concentrate)100 ml
85R-202High Load Streptavidin-PolyHRP Conjugate1 ml
43R-MIGHRP80Mouse anti Human IgG (Poly-HRP80)1 mg

 

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